在芯片USB引脚就近切断走线，使用等长的飞线连接USB座子(不是板子上的USB座，是额外的)
然后插优盘测试。
如果你要用板子上的USB座测试，那么USB座的信号线也要切断。也就是放弃你画的走线。

总之这种情况大概率是信号完整性问题。

你的板子是双层板，在设计时建议：
1.如果阻抗值无法满足，起码要满足阻抗连续，双层板的做法就是保证信号线的背面有连续的地平面，且沿信号线打地孔。如果不知道怎么做，建议拆个华为的光猫看一下你就懂了。华为的低成本光猫都是双层板，他是如何做DRAM走线、2.5G光差分信号、1G网口信号、USB信号，都是值得学习的。
2.少过孔，做等长。虽然你这个走线过孔其实不多，但问题也恰恰最有可能出在孔上，你要知道现在的快板厂，过孔质量其实很渣，这也是为什么有些板厂提出四线低阻这个东西，虽然是噱头吧，但是也是有道理的，起码他可以保证自己的过孔有实力。
3.避免串扰，高速信号远离其他信号线。
4.供电串扰问题，加磁珠，退耦电容。